常州市食品添加剂耐高温温а-淀粉酶活力

A2α-淀粉酶活力的测定

A.2.1α-淀粉酶

能水解淀粉分子链中的a-1,4葡萄糖苷键,将淀粉链切断成为短链糊精和少量麦芽糖和葡萄糖,使淀粉黏度迅速下降的酶。

A.2.2α-淀粉酶活力

A.2.2.1 中温α-淀粉酶活力单位

1 g固体酶粉(或1 mL,液体酶),于60 ℃,pH 6.0条件下,1 h液化1 g可溶性淀粉,即为1个酶活力单位，以 U/g(U/ml)表示。

A.2.2.2耐高温α-淀粉酶活力单位

1 g固体酶粉(或1 mL液体酶),于70 ℃,pH 6.0条件下,1 min液化1 mg可溶性淀粉,即为1个酶活力单位,以 U/g(U/mL)表示。

A.2.3 原理

a-淀粉酶制剂能将淀粉分子链中的a-14葡萄糖苷键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖,而使淀粉对碘呈蓝紫色的特性反应逐渐消失,呈现棕红色,其颜色消失的速度与酶活性有关,据此可通过反应后的吸光度计算酶活力。

A.2.4试剂和材料

A.2.4.1碘。

A.2.4.2碘化钾。

A2.4.3原碘液:称取11.0g碘和220 g碘化钾,用少量水使碘完全溶解,定容至500 mL,贮存于棕色瓶中。A.2.4.4﹑稀碘液:吸取原碘液⒉2.00 mL,加20.0 g碘化钾用水溶解并定容至500 ml.,贮存于棕色瓶中。

A.2.4.5﹐可溶性淀粉溶液(20 g/L):称取2000 g(**至0.001 g)可溶性淀粉(以绝干计)于烧杯中，用少量水调成浆状物,边搅拌边缓缓加入70 ml,沸水中,然后用水分次冲洗装淀粉的烧杯,洗液倒入其中,搅拌加热至完全透明,冷却定容至100 ml。溶液现配现用。

注:可溶性淀粉应采用酶制剂分析**淀粉。

A2.4.6磷酸缓冲液(pH 6.0);称取45.23g磷酸氢二钠(Nae HPO·12HO)和8.07 g柠檬酸(CaHO·HO),用水溶解并定容至1 000 ml。用pH计校正后使用。