扬州市饲用纤维素酶活性机构

GB/T 23881-2009饲用纤维素酶活性的测定滤纸法

1范围

本标准规定了以滤纸为底物,用还原糖比色法测定饲用纤维素酶活性的方法。本标准适用于饲用纤维素酶活性的测定,定量限为0.02 U/mL。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用面成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括斯误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的*新版本。凡是不注日期的引用文件,其*新版本适用于本标准。

GB/T 6682分析实验用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样

GB/T 20195动物饲料试样的制备

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

滤纸纤维素酶活性单位rilter paper cellulase activity unit

在37℃,pH5.5,反应60 min 的条件下﹐每分钟降解滤纸释放1 umol葡萄糖所需的酶量,定义为一个滤纸纤维素酶活性单位,以U表示。

4原理

纤维素酶水解踏纸产生的纤维二糖、葡萄糖等还原糖能将碱性条件下的3,5-二硝基水杨酸还原，生成棕红色的氨基化合物,在540 nm波长处有*大吸收,在一定范围内酶解产生的还原糖的量与反应液的吸光值成正比。

5试剂和材料

本标准使用的试剂均为分析纯,水均为符合GB/T 6682中规定的二级水。

5.1酒石酸钾钠(CHKNaO。-4L:O)。

5.2苯酚。

5.3亚硫酸钠。

5.4溶液(200 g/L):称取20.0 g,加 100 mL水溶解。

5.5柠檬酸溶液(0.1 mol/L):称取柠檬酸(C·H,O,·HO)2.10 g,加水溶解定容至100 mL,

5.6柠檬酸钠溶液(0.1 mol/L):称取柠檬酸钠(NaCH,O,·2H,O)2.94 g,加水溶解定容至100 mL.

5.7柠檬酸盐缓冲液(0.05 mol/L,pH5.5):称取柠檬酸(CHaO·H.O)10.5 g,加人5.0 g,再加 800 mL水溶解,用柠檬酸溶液(5.5)或柠檬酸钠溶液(5.6)调节 pH 至5.5,再用水定容至1 000 mL.